Beyotime碧云天lipo8000转染试剂(c0533)现货供应

产品名称：Beyotime碧云天lipo8000转染试剂(c0533)现货供应

产品货号：c0533

产品品牌：碧云天

产品简介：

碧云天lipo8000转染试剂(c0533)是碧云天最新研发的一种以纳米材料为基础的zui便捷的高效细胞转染试剂，达到甚至超过了国际主流转染试剂的转染效果，并且转染过程无须任何孵育时间，实现了细胞转染的至简操作。适用于把质粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸、以及核酸蛋白复合物或带负电荷的蛋白转染到真核细胞中，也可以用于活体动物的核酸转染以及用于基因治疗。

常见问题：

1. 转染效率低：

a. 优化质粒与Lipo8000™转染试剂比例，对于难转染的细胞，可适当增加Lipo8000™转染试剂的用量。

b. 应使用高纯度、无菌、无污染物的质粒进行转染，DNA纯度方面A260/A280比值要接近1.8，通常宜控制在1.8-1.9范围内，偏低则有可能有蛋白污染，偏高则有可能有RNA污染。可以使用碧云天生产的质粒大量抽提试剂盒(D0026)进行抽提，以保证可以获得较高的转染效率。

c. 贴壁细胞转染时状态良好，细胞密度达70-80%时才可进行转染，过稀或过密都可能影响转染效率，不同细胞的最佳转染密度需要自行摸索。悬浮细胞宜在对数生长期进行转染。

d. 需使用无抗生素和无血清培养液配制Lipo8000™转染试剂和质粒或siRNA等的混合物。

e. 转染后培养时间不足，而被误以为转染效率偏低。不同细胞转染后至显著表达所需要培养的时间通常为24-48小时。

f. 检查细胞是否有支原体感染，支原体感染会影响细胞增殖，并很可能影响转染效率。

g. 使用传代次数相对较少的细胞，细胞传代次数太多，对转染效率会有一定的影响。

h. 如果没有检测到目的蛋白表达，应该仔细核对转染质粒的测序结果，确保测序结果和读码框wan全正确。启动子、复制起始位点、质粒大小都会影响基因表达水平。

i. 如果靶基因的敲减(knockdown)效果欠佳，应该考虑尝试设计不同的siRNA。

2. 出现一定程度的细胞毒性：

a. 转染前，细胞至少铺板 18-24 小时。

b. 质粒用量不变，Lipo8000™转染试剂的用量减少 25%。例如通常六孔板每孔使用 2.5μg 质粒，4μl Lipo8000™，如果发现有细胞毒性，六孔板每孔可以尝试使用 2.5μg 质粒，3μl Lipo8000™，此时经测试对于转染效率没有很明显的影响。

c. 减少质粒用量，按照比例减少 Lipo8000™转染试剂；或在前者的基础上 Lipo8000™转染试剂用量再减少 25%。

d. 检查是否转染时细胞密度太低，Lipo8000™转染时细胞密度以 70-80%为佳。

e. 某些细胞对 Lipo8000™转染试剂比较敏感，可以在转染后 4-6 小时更换细胞培养液，转染效率无显著影响。

f. 检查细胞是否有支原体等微生物污染。

产品选购：

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